當前位置：分離原理液—液分配色譜法
點擊次數：1385 更新時間：2016-03-02
分離原理液—液分配色譜法
（Liquid-liquid Partition Chromatography）及化學鍵合相色譜（Chemically Bonded Phase Chromatography） 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于液相色譜計算公式：ELISA試劑盒
液相色譜計算公式式中,cs—溶質在固定相中濃度；cm--溶質在流動相中的濃度； Vs—固定相的體積；Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大；但也有不同之處,GPC中，流動相對K影響不大,LLPC流動相對K影響較大。
a. 正相液— 液分配色譜法（Normal Phase liquid Chromatography）: 流動相的極性小于固定液的極性。
b. 反相液— 液分配色譜法（Reverse Phase liquid Chromatography）: 流動相的極性大于固定液的極性。ELISA試劑盒
c. 液 — 液分配色譜法的缺點：盡管流動相與固定相的極性要求*不同，但固定液在流動相中仍有微量溶解；流動相通過色譜柱時的機械沖擊力，會造成固定液流失。上世紀70年代末發展的化學鍵合固定相（見后），可克服上述缺點。現在應用很廣泛（70~80%）。液—固色譜法流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據物質吸附作用的不同來進行分離的。
其作用機制是：當試樣進入色譜柱時，溶質分子 （X） 和溶劑分子（S）對吸附劑表面活性中心發生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是S）。ELISA試劑盒
